項目介紹

原位雜交技術(shù)(In situ hybridization，ISH)是利用核酸分子互補配對使雜交探針可以特異性結(jié)合于組織或細(xì)胞中目標(biāo)核酸分子，再通過探針帶有的地高辛或者熒光標(biāo)記物，特異性鑒定、檢測目標(biāo)核酸分子的相對含量以及在組織細(xì)胞中的定位。因此原位雜交可以在組織或細(xì)胞原有結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)之上(組織切片或細(xì)胞)，檢測某種基因的有無，定位及半定量。熒光標(biāo)記探針進(jìn)行原位雜交即為FISH(Fluorescence in situ hybridization)，可以替代放射標(biāo)記物，靈敏度高、實驗效率高。

應(yīng)用

原位雜交可以定性檢測組織細(xì)胞中的mRNA、lncRNA、circRNA，也可以定位及分析染色質(zhì)中的基因。利用特異性16s RNA探針還可以簡單樣品中的細(xì)菌、古細(xì)菌，還可以通過特意探針鑒定組織細(xì)胞中的病毒。FISH能夠用來檢測或確認(rèn)基因或染色體是否異常，醫(yī)學(xué)和品種鑒定、DNA特定功能研究。利用FISH方法還可檢測非整倍體、基因重排、拷貝數(shù)變異等。

樣本保存運輸

組織冰凍切片

組織切取需要部位，厚度在2mm 左右, PBS 漂洗，干冰運輸或立即置于固定液中。組織固定有原位雜交固定液(動物)、原位雜交固定液(植物)、原位雜交固定液(較嫩植物)，室溫固定12 小時(根據(jù)組織大小)以上，植物組織固定時需常溫抽真空30min，再用純水或PBS 清洗兩次后， 放入15% 蔗糖溶液中，4℃脫水8 小后，換30% 蔗糖溶液4℃過夜。冰切時佩戴手套。冰凍切片放-20℃或-80℃ 保存?zhèn)溆谩?/p>

組織石蠟切片

組織切取需要部位，厚度在2mm 左右, PBS 漂洗后立即固定。動物組織用原位雜交固定液(動物)，植物組織用原位雜交固定液(植物)或原位雜交固定液(較嫩植物)，植物組織固定時需常溫抽真空30min，固定12h 以上。固定完成后脫水、包埋、切片。梯度酒精配制需用DEPC 水。石蠟常規(guī)保存?zhèn)溆谩?/p>

標(biāo)本運輸

冰凍切片：標(biāo)本放原位雜交固定液中，常溫運輸;冰凍切片-20℃運輸;新鮮組織干冰運輸。交接單隨樣本一起，單獨封裝。

石蠟切片：標(biāo)本放原位雜交固定液中，常溫運輸;石蠟切片常溫運輸。交接單隨樣本一起，單獨封裝。

細(xì)胞爬片：細(xì)胞爬片加原位雜交固定液后密封4℃運輸。交接單隨樣本一起，單獨封裝。

DEPC 水配制

純水中加入0.1%DEPC 原液震蕩攪拌2h 后靜置過夜后高壓滅菌，有效滅菌時間30min 以上，或直接購買。

結(jié)果展示

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　　價格列表

• 服務(wù)項目	價格
  Tunel（白光）檢測	200元/張
  Tunel（熒光）檢測	200元/張
  IF Tunel 雙染	250元/張
  Tunel( 芯片）	550元/張
  原位雜交（DAB 顯色）	240元/張
  原位雜交（FISH 單標(biāo)）	240元/張
  原位雜交（FISH、IF 雙染）	300元/張
  原位雜交（FISH 雙標(biāo)）	300元/張
  原位雜交（FISH 三標(biāo)）	350元/張
  原位雜交（芯片）	500 元起
  探針設(shè)計合成（一端標(biāo)記、BIO）	600元/條
  探針設(shè)計合成（一端標(biāo)記、DIG）	1000 元 / 條
  探針設(shè)計合成（一端標(biāo)記、FAM）	1100 元 / 條
  探針設(shè)計合成（一端標(biāo)記、Cy3）	1900 元 / 條
  探針設(shè)計合成（兩端標(biāo)記、BIO）	1200 元 / 條
  探針設(shè)計合成（兩端標(biāo)記、DIG）	1690 元 / 條
  探針設(shè)計合成（兩端標(biāo)記、FAM）	1400 元 / 條
  探針設(shè)計合成（兩端標(biāo)記、Cy3）	2500 元 / 條