DAB顯色試劑盒

【產(chǎn)品簡介】

免疫顯色試劑是二步法免疫組化試劑盒，適合與兔或鼠源一抗配用。其主要過程為，一抗 與切片中的靶抗原形成抗原抗體復合物，酶標羊抗鼠/兔 IgG 聚合物與抗原抗體復合物中的一抗 結(jié)合，再利用辣根過氧化物酶催化二氨基聯(lián)苯胺 (DAB) 在抗原部位形成棕色顯色。由于該系統(tǒng) 不含生物素和鏈親和素，所以不受內(nèi)源性生物素干擾，染色背景非常清晰。

【產(chǎn)品組成 】

【儲存與運輸】

本試劑需低溫運輸，貯存于 4℃低溫環(huán)境，有效期一年

【使用方法】

常規(guī)脫蠟水化：

石蠟切片經(jīng)常規(guī)脫蠟和水化。

抗原熱修復：

參照一抗說明書進行抗原修復。

DAB 工作液的配制：

按每毫升 DAB 緩沖液 (試劑 B) 中加入 50 μL DAB 色原 (試劑 A)  (約 1 滴) 的比例配制 DAB 工作液，DAB 工作液應現(xiàn)配現(xiàn)用。配制好的 DAB 工作液需在 2 小時內(nèi)使用，如出現(xiàn)沉淀， 使用前先混勻。

操作步驟：

1) 抗原修復完畢后自然冷卻的切片，用自來水清洗。

2) 除去切片上組織周圍的液體，用免疫組化筆圈定玻片上的待測組織區(qū)域并放入 PBST 緩 沖液中。

3) 取出切片，除去 PBST 緩沖液，滴加內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑 (視切片大小以完全覆蓋 切片組織為宜) ，于組織上孵育 10 分鐘，用 PBST 清洗切片。

4)除去 PBST 緩沖液，滴加 100μL 左右一抗工作液(視切片大小以完全覆蓋切片組織為宜)， 于組織上進行孵育 (按照各自一抗說明書操作) 。一抗孵育完畢，用 PBST 清洗切片。

5) 除去 PBST 緩沖液，每張切片加酶標羊抗鼠/兔 IgG 聚合物 100μL 左右 (視切片大小以 完全覆蓋切片組織為宜) ，室溫下孵育 30 分鐘。PBST 緩沖液清洗切片。

6) 用預備好的 DAB 工作液進行顯色，每張切片加 100μL 左右 DAB 工作液 (視切片大小以 完全覆蓋切片組織為宜) ，顯色時間為 1-5 分鐘 (鏡檢控制染色) ，用自來水沖洗終止顯色反 應。

7) 需要時，使用蘇木素染液復染。

8) 切片經(jīng)過脫水，透明，封片。

注：若將本試劑應用于自動檢測平臺，需根據(jù)實際情況確認使用條件。

【注意事項】

1.本免疫顯色試劑僅用于體外診斷，不作其他用途。

2.開始實驗前，應仔細閱讀此說明書。

3.請在試劑盒有效期內(nèi)使用。

4.本免疫顯色試劑僅限有專業(yè)經(jīng)驗或經(jīng)專業(yè)培訓的人員使用。

5.操作時請穿實驗服，并佩戴一次性手套。