細(xì)胞培養(yǎng)

價(jià)格￥2000
單位批
貨號HKF6001
品牌浩克

產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品參數(shù)

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服務(wù)介紹：

貨號	名稱	規(guī)格	價(jià)格
HKF6001	細(xì)胞培養(yǎng)	批	2000元

　簡介：
　　細(xì)胞培養(yǎng)是采用無菌操作的方法，模擬動物體內(nèi)的生理?xiàng)l件，在體外進(jìn)行培養(yǎng).使其不斷地生長、繁殖，從而觀察細(xì)胞的增殖、分化以及細(xì)胞衰老等過程的生命現(xiàn)象。常見的細(xì)胞培養(yǎng)方式可分為貼壁和懸浮兩種。細(xì)胞培養(yǎng)的常規(guī)操作包括：
1)細(xì)胞的接種和傳代
2)細(xì)胞計(jì)數(shù)
3)細(xì)胞的復(fù)蘇和凍存。
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
　　1、完全培養(yǎng)基配置：培養(yǎng)基的配制(需在超凈臺內(nèi)無菌操作)：10%FBS+90%培養(yǎng)基(根據(jù)細(xì)胞的種類分為DMEM/F12、DMEM/HIGH、
MEM/EBSS、改良型RPMI-1640培養(yǎng)基)。
　　2、細(xì)胞復(fù)蘇：
a. 把凍存管從液氮中取出來，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動。液體都融化后(大概1-1.5分鐘)，拿出來噴點(diǎn)酒精放到超凈工作臺里。
b.把上述細(xì)胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基15ml的離心管中(用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細(xì)胞都洗下來)，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
c.把上清液倒掉，加1ml培養(yǎng)基把細(xì)胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中前后左右輕輕搖動，使培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞均勻分布。
d.標(biāo)好細(xì)胞種類和日期等，放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細(xì)胞貼壁后換培養(yǎng)基。
e. 3天換一次培養(yǎng)基。
　　3、細(xì)胞傳代：
a. 培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。
b.把原有培養(yǎng)基吸掉。
c.加適當(dāng)?shù)囊鹊鞍酌?能覆蓋細(xì)胞就行)，消化1-2分鐘。
d.細(xì)胞都變圓后吸出胰酶終止消化。
e.加入20ml的完全培養(yǎng)基，移液槍吹打細(xì)胞，把細(xì)胞都懸浮起來。
f.根據(jù)細(xì)胞種類把細(xì)胞傳到幾個(gè)培養(yǎng)瓶中。一般，癌細(xì)胞分4個(gè)，正常細(xì)胞傳3個(gè)。繼續(xù)培養(yǎng)。
　　4、細(xì)胞凍存：
把細(xì)胞消化下來并離心(同上)。用配好的凍存液把細(xì)胞懸浮起來，分裝到滅菌的凍存管中，靜止幾分鐘，寫明細(xì)胞種類，凍存日期。
4℃30min，-20℃30min，-80℃過夜，然后放到液氮罐中保存。
凍存液的配制：70%的完全培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，邊滴邊搖。

樣本寄送須知：

　　1.活細(xì)胞：一定要不透氣方瓶寄，常溫;

　　2.凍存細(xì)胞：純干冰件，保證干冰充足

無

暫無

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　常用的細(xì)胞培養(yǎng)基：

名稱	成份	適用細(xì)胞類型	備注
MEM	BSS＋12種氨基酸＋谷氨酰胺＋8種維生素	各種傳代細(xì)胞系和原代細(xì)胞	在此基礎(chǔ)上改良的培養(yǎng)基有BEM、DMEM
DMEM	改良自MME，各成分量加倍	貼附型腫瘤細(xì)胞，CHO細(xì)胞	分低糖（5.5mM）、高糖（25mM）型，高糖型較常用
RPMI-1640	BSS＋21種氨基酸＋維生素11種等	懸浮細(xì)胞，正常細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞	最初針對淋巴細(xì)胞設(shè)計(jì)
L15	半乳糖替代了葡萄糖;磷酸鹽緩沖體系	快速增殖瘤細(xì)胞，CO2缺乏	以半乳糖代替了葡萄糖
McCoy5A	BSS＋40種成分	原代細(xì)胞，淋巴細(xì)胞，組織活檢細(xì)胞	最初為肉瘤細(xì)胞設(shè)計(jì)
DMEM/F12	高濃度與成分多樣化	原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系	F12與DMEM等體積混合，可作為開發(fā)無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方

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